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品牌:原鑫生物
貨號:YX-SS-D23148
規格:48T/96T
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小鼠補體蛋白4elisa試劑盒研究錘頭狀核酶通過調控CD95的表達,對小鼠胰島細胞凋亡的影響;探索提高胰島移植物存活率的新途徑.方法體外構建針對CD95 mRNA 93位點的錘頭狀核酶(pU6-Rz93)和突變型核酶(pU6-dRz93).采用Ⅴ型膠原酶消化法分離小鼠胰島細胞,通過干擾素-γ(IFN-γ)和白細胞介素1α(IL-1α)誘導其高表達CD95后,經鈉米載體-Effectene將核酶轉染至該細胞.通過逆轉錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)和免疫印跡檢測(Western blot)法檢測胰島細胞CD95的表達.胰島細胞經抗CD95的抗體(JO2)作用后,以Caspase-3活性檢測試劑盒檢測轉染前后細胞Caspase-3活性的變化;MTT法測細胞的增殖;Annexin-Ⅴ凋亡檢測試劑盒檢測細胞凋亡,并觀察了各組細胞對細胞毒T淋巴細胞(CTL)殺傷的反應能力.結果細胞因子可誘導小鼠胰島細胞高表達CD95分子.轉染pU6-Rz93組的胰島細胞CD95的表達與轉染空載體組和轉染pU6-dRz93組相比,明顯下降.經JO2處理后,轉染pU6-Rz93組胰島細胞的Caspase-3活性和凋亡率明顯降低,細胞增殖活性和抵抗CTL殺傷的能力顯著增強.結論針對Fas mRNA 93位點的錘頭狀核酶能顯著抑制小鼠胰島細胞CD95的表達,使其免于CD95途徑的凋亡;為提高胰島移植物的存活率提供了實驗基礎。


小鼠補體蛋白4elisa試劑盒核因子kB受體活化因子配基(RANKL)是誘導破骨細胞分化, 成熟的重要因子,在生物學及醫學研究中具有廣泛的應用。RANKL主要結合到破骨前體細胞的核因子kB活化因子受體(RANK)上,啟動下游NF- kB,P38,ERK,JNK等信號通路,刺激破骨細胞的分化,成熟及成熟后的破骨細胞存活。由于RANKL在破骨細胞的發育過程中發揮重要作用,所以它 的失調可引發多種骨骼疾病,如骨質疏松,風濕性關節炎等疾病。


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